产品货号：
P99015
中文名称：
RIPA裂解液
英文名称：
RIPA Lysis Buffer
产品规格：
50mL
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本制品是一种适用于细胞和组织的快速裂解液，裂解得到的蛋白样品可以用于Western Blot、IP等实验。RIPA裂解液主要成分为50mM Tris (pH7.4)，150mM NaCl，1% Triton X100，0.5% sodium deoxycholate，0.1% SDS，sodium fluoride，EDTA等，可以有效抑制蛋白降解。
注意事项：
使用方法：
一、对于培养细胞样品
二、对于组织样品
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注意事项：
- 为取得最佳的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
- 需自备PMSF和sodium orthovanadate。
- 裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
- 由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法来测定由本产品裂解所获得样品的蛋白浓度。
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
- RIPA裂解液的裂解产物中会出现一小团透明胶状物，为含有基因组DNA等的复合物。在低温的条件下，用超声处理打碎打断该透明胶状物，随后10000转离心取上清用于后续实验。
- 本制品室温保存，一年有效。
使用方法：
一、对于培养细胞样品
- 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，使用前数分钟内加入PMSF和sodium orthovanadate，PMSF终浓度为1mM，sodium orthovanadate终浓度为0.005mM。
- 对于贴壁细胞：先用细胞刮收集细胞，连同培养液一起，在4℃条件下1700转离心5分钟（最大转速不超过2000转），取沉淀，用预冷的PBS洗涤两次，在4℃条件下2000转离心5分钟，倒掉上清。
- 对于悬浮细胞：收集细胞，在4℃条件下1700转离心5分钟（最大转速不超过2000转），用手指把细胞用力弹散。
- 按每106细胞中加入100μL裂解液的比例加入适量的裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。
二、对于组织样品
- 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，使用前数分钟内加入PMSF和sodium orthovanadate，PMSF终浓度为1mM，sodium orthovanadate终浓度为0.005mM。
- 将组织快速剪切成细小的碎片。
- 按每20mg组织加入100μL-200μL裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。
- 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
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